狂犬病疫苗效价测定改良NIH建立及应用

目的 按照动物试验3R原则,建立改良NIH法 （Modified NIH,M-NIH）即单一稀释法检测狂犬病疫苗（简称狂苗）效价,替代传统的NIH法。方法 通过比较单一稀释度的待检疫苗与第八批狂犬病疫苗效力试验用国家标准品（简称标准品）的小鼠保护率,建立狂苗效价测定的改良-NIH法,并对该方法进行重复性、准确性及适用性验证。采用M-NIH法和NIH法对52批狂苗进行比较研究,再联合9家实验室验证共计247批次狂苗,使用Kappa系数和Mcnemar-Bowker检验 评价两种方法的一致性。并采用3家企业生产的狂苗,进行适用性验证。对M-NIH法获批准后近4年来应用于狂苗批签发检验做回顾性分析。结果 52批次狂苗效价测定的两种方法比较研究结果显示,两种方法的符合率为92.3%（kappa=0.82,P<0.01）;247批次狂苗扩大验证结果表明两种方法的符合率为80.2%（kappa= 0.54,P<0.01）。采用M-NIH法测定标准品保护率时,实验室内变异系数为21.7%,实验室间变异系数为23.4%。3家企业批签发狂苗适用性验证结果表明M-NIH重复性检测结果与NIH结果符合率为100%。近4年来批签发机构采用M-NIH法抽检820批狂苗效价,合格率为93.8%;M-NIH不合格批次最终经NIH法测定后,狂苗效价合格率合计为99.8%。结论 建立了改良-NIH法。该方法获得批准后用于狂苗的效价检测,大大减少了动物使用量,提高了狂苗的批签发效率。

Establishment and application of M-NIH for potency test of rabies vaccine