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周围神经再生条件液中蛋白条带质谱分析
引用本文:李玉萍,姜浩,李青峰,王会勇,汤璐佳,郑胜武,刘琴秀,昝涛,谢芸,陈瑜,郑丹宁. 周围神经再生条件液中蛋白条带质谱分析[J]. 中国修复重建外科杂志, 2007, 21(6): 596-599
作者姓名:李玉萍  姜浩  李青峰  王会勇  汤璐佳  郑胜武  刘琴秀  昝涛  谢芸  陈瑜  郑丹宁
作者单位:上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科,上海,200011
摘    要:目的研究神经再生条件液(nerve regeneration conditioned fluid,NRCF)中具有神经再生趋化活性的蛋白成分,对相对分子质量为(232~440)×10^3的蛋白条带进一步行分离和定性。方法新西兰大白兔6只,体重1.8~2.5kg,取坐骨神经建立神经再生室模型。术后7d采集NRCF进行自然聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)分离,切取相对分子质量为(232~440)×10^3区域的蛋白条带,采用Shotgun蛋白质组学策略、液相色谱-串联质谱对其组分进行定性分析。结果NRCF的Native-PAGE电泳结果显示,相对分子质量在669×10^3以上、(232~440)×10^3和(140~232)×10^3分别有1条蛋白带,在(67~140)×10^3有6条蛋白带。其中相对分子质量在(232~440)×10^3的蛋白条带共鉴定到54种蛋白质,主要集中在等电点5.5~8.0,相对分子质量为(10~40)×10^3范围内,其中4种是未命名蛋白质。这54种蛋白质可归类为结合蛋白(43%)、转运蛋白(30%)、酶(6%)、信号转导蛋白(4%)和分子功能未知(17%)。54种蛋白质的亚细胞定位主要是分泌性蛋白(63%),其他的位于细胞膜和胞浆内等。结论采用Native-PAGE和Shotgun蛋白质组学分析NRCF中相关蛋白质,确定了NRCF中相对分子质量为(232~440)×10^3条带的蛋白质组分,为进一步研究其中的功能未知蛋白提供了线索,对明确其是否对周围神经再生具有促进作用。

关 键 词:神经再生条件液  自然聚丙烯酰胺凝胶电泳  Shotgun蛋白质组学  质谱分析  
修稿时间:2006-12-172007-03-09

ANALYSIS OF PROTEIN BAND IN PERIPHERAL NERVE REGENERATION CONDITIONED FLUID BY SHOTGUN TECHNIQUE
LI Yuping, JIANG Hao, LI Qingfeng,et al.. ANALYSIS OF PROTEIN BAND IN PERIPHERAL NERVE REGENERATION CONDITIONED FLUID BY SHOTGUN TECHNIQUE[J]. Chinese journal of reparative and reconstructive surgery, 2007, 21(6): 596-599
Authors:LI Yuping   JIANG Hao   LI Qingfeng  et al.
Affiliation:LI Yuping, JIANG Hao, LI Qingfeng, et al.
Abstract:
Keywords:Nerve regeneration conditioned fluid   Native-polyacrylamide gel electrophoresis   Shotgun   proteomics   Mass spectral analysis   Rabbit
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