| 间质细胞双尾C基因条件性敲除小鼠模型建立及其表型分析题录 |
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| 引用本文： | 尹艳爽,李秀,杨志岗,马世泽,曹焱,肖苒.间质细胞双尾C基因条件性敲除小鼠模型建立及其表型分析题录[J].中华整形外科杂志,2023(9). |
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| 作者姓名： | 尹艳爽 李秀 杨志岗 马世泽 曹焱 肖苒 |
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| 作者单位： | 1. 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心 中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室;2. 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院病理科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81873666)； |
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| 摘 要： | 目的构建间质细胞双尾C(Bicc1)基因条件性敲除小鼠模型, 并对其表型进行分析。方法将CRISPR Cas9方法构建的Bicc1f/+小鼠子代与Pdgfra启动子驱动的Cre小鼠进行杂交, 获得子代小鼠, 饲养1～2周后提取其脚趾及鼠尾组织基因组DNA, 经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后, 在DNA水平检测小鼠基因型;选取经鉴定后生长至3周龄的Bicc1基因条件性敲除小鼠(实验组)、野生型小鼠(对照组)各3只进行后续实验:通过腹腔注射他莫昔芬进行诱导敲除Bicc1基因, 于1周后取小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤及脂肪组织, 一部分组织通过实时定量PCR(RT-qPCR)鉴定其中的Bicc1 mRNA表达水平;另一部分组织以10%多聚甲醛固定, 随后进行HE染色和Masson染色, 在光镜下观察分析。应用SPSS 28.0软件对数据进行分析, 组间比较采用t检验, P<0.05表示差异有统计学意义。结果通过繁育获得间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠, 基因型为Bicc1f/fCre+/-, 野生型小鼠基因型为Bicc1f/fCre-/-;RT-qPCR检测结果显示, 实验组小鼠肾脏、骨骼...
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| 关 键 词： | 小鼠 基因敲除 间质细胞 双尾C基因 条件性基因敲除 他莫昔芬 |
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