灰兜巴中过氧化物酶体增殖物激活受体γ活性部位的筛选

目的 通过构建过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂的细胞筛选模型，检测灰兜巴的不同极性提取物对PPARγ的激活效率。为开发新型、高效、安全的天然PPARγ激动剂提供可靠的实验依据。方法 采用Lipofectamine3000转染试剂将重组质粒pBIND-PPARγ-LBD与报告质粒pGL4.35共同转入293T细胞中，同时在293T细胞中只转染pGL4.35报告质粒作为阴性对照，以PPARγ激动剂人工合成配体吡格列酮作为阳性对照药，通过检测荧光素酶活性来计算灰兜巴的不同极性提取物对PPARγ的激活作用。所有结果均使用Origin2021软件分析计算，样品间差异有统计学意义(P<0.05)。结果 阳性对照组加入0.75μmol/L的吡格列酮后荧光强度较空白对照组荧光强度增加1.27倍，差异有统计学意义(P<0.05),阴性对照组加入吡格列酮后未见荧光素酶被激活；共转染细胞组加入不同浓度(400、200μg/mL和100μg/mL)灰兜巴的不同极性提取物后，荧光素酶激活程度各不相同，其中400μg/mL的正己烷、正丁醇、水提醇沉上清、水提醇沉部分的激活能力相当于空白...