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LAPTM4B新基因在肿瘤细胞中的表达及其免疫学检测技术的建立
引用本文:彭方毅 张青云 周柔丽 涂植光 王雅明 徐建军. LAPTM4B新基因在肿瘤细胞中的表达及其免疫学检测技术的建立[J]. 临床检验杂志, 2005, 23(6): 408-411
作者姓名:彭方毅 张青云 周柔丽 涂植光 王雅明 徐建军
作者单位:重庆医科大学医学检验系,重庆,400016;北京肿瘤医院检验科;北京市肿瘤防治研究所免疫研究室;北京大学基础医学院细胞生物学与遗传学系;北京肿瘤医院检验科
基金项目:北京市自然科学基金重点项目(编号:7041003)
摘    要:目的 利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达。方法 重组质粒pGEX—KG—LAPTM4B—N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1mmol/L IPTG37℃诱导获得融合蛋白。利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达。结果 经western blot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B—N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合。免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白。IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达。结论 该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件。

关 键 词:溶酶体相关4次跨膜蛋白B(LAPTM4B)  肝癌  单克隆抗体
文章编号:1001-764X(2005)06-0408-04
收稿时间:2005-03-07
修稿时间:2005-06-18

Expression of a novel LAPTM4B gene in tumor cells and establishment of its immunoassay
PENG Fangyi,ZHANG Qingyun,ZHOU Rouli,TU Zhiguang,WANG Yaming,XU Jianjun,et al.. Expression of a novel LAPTM4B gene in tumor cells and establishment of its immunoassay[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2005, 23(6): 408-411
Authors:PENG Fangyi  ZHANG Qingyun  ZHOU Rouli  TU Zhiguang  WANG Yaming  XU Jianjun  et al.
Affiliation:1. Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China ;2. Department of Medical Laboratory, Beijing Cancer Hospital, BeijinglO0036 ;3. Department of Cell Biology and Genetics, Peking University School of Basic Medical Sciences, Beijing100083
Abstract:
Keywords:LAPTM4B(lysosome-associated protein transmembrane 4B)  hepatocellular carcinoma  monoclonal antibody
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