应用Southern印迹杂交法检测转移基因在宿主细胞中的整合

目的 应用Southern印迹杂交法（Southern blot)证实转移基因整合至宿主细胞基因组DNA。方法 酚氯偏法提取基因转导的PA317/AIM及K562/AIM细胞基因组DNA，以聚合酶链反应（PCR）扩增转移基因片段，随机引物法标记^32P-DNA探针，与经BamHI酶切、琼脂糖凝胶电泳、转移至尼龙膜的基因组DNA进行Southern杂交反应，检测转移基因的整合。结果 PCR反应和Southern blot分析证实转移基因存在于受体细胞基因组DNA中。结论 Southern印迹杂交法证实转移基因稳定整便至逆转录病毒生产细胞PA317/AIM及靶细胞K562/AIM中。