司马西特通过Notch/RANKL诱导破骨细胞形成的初步研究

目的:探索γ分泌酶抑制剂司马西特通过Notch对核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导破骨细胞形成以及骨吸收功能的影响及机制.方法:提取5周龄C57/BL6鼠的骨髓腔巨噬细胞进行培养,通过MTT法检测司马西特对巨噬细胞的半抑制浓度(IC50),通过破骨细胞诱导、TRAP染色及骨吸收试验评估司马西特对破骨细胞形成的影响,通过实时荧光定量RT?PCR检测破骨细胞形成相关基因的表达,Western blot法检测Notch信号通路相关蛋白的表达.结果:培养24、48、96 h时,司马西特对巨噬细胞的IC50分别是6.03、5.79、5.18μmol/L.TRAP染色显示,对照组破骨细胞形成数量(209±8)个/孔,100、200、400 nmol/L司马西特组的破骨细胞数量分别为(183±14)、(91±10)、(22±7)个/孔(P<0.05).体外骨吸收结果显示,对照组骨吸收面积百分比(93.3±3.0)％,100、200及400 nmol/L司马西特组的骨吸收面积百分比分别为(80.6±6.6)％、(52.2±6.6)％、(27.4±5.8)％(P<0.05).C?fos、TRAP、Cath?K以及NFATc1等破骨相关基因表达量随着司马西特用药浓度的增高而显著降低(P<0.05).400 nmol/L司马西特组Cleaved?Notch1、NFATc1以及Hes1表达量降低(P<0.05).结论:司马西特通过抑制Notch信号通路,抑制破骨细胞的分化以及骨吸收,对骨关节炎具有潜在的治疗作用.