米诺环素通过Wnt/β-Catenin通路对大鼠牙髓干细胞成骨分化的影响

目的 探讨米诺环素对大鼠牙髓干细胞(RDPSCs)成骨分化的影响,以及对Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-Catenin)通路的作用.方法 将RDPSCs随机分为对照组和不同浓度(0.1、1.0、10.0、100.0 mg/L)米诺环素组,对细胞进行成骨诱导.CCK-8法检测细胞增殖率,试剂盒检测骨形成指标碱性磷酸酶(ALP)和骨钙蛋白(OCN)含量;茜素红S染色检测细胞钙盐沉积量;qRT-PCR检测ALP和OCN mRNA表达情况;蛋白质免疫印迹技术(WB)检测β-Catenin、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达水平.结果 与对照组相比,0.1、1.0 mg/L米诺环素组RDPSCs细胞增殖率、ALP活性、OCN含量、钙盐沉积量及β-Catenin、Runx2蛋白水平均显著升高,GSK-3β蛋白水平显著降低(P<0.05);10.0、100.0 mg/L米诺环素组RDPSCs细胞增殖率显著升高(P>0.05),ALP活性、OCN含量及表达水平、钙盐沉积量及β-Catenin、Runx2蛋白水平均显著降低,GSK-3β蛋白水平显著升高(P<0.05).结论 低浓度米诺环素能够诱导大鼠牙髓干细胞成骨分化,而高浓度米诺环素抑制细胞成骨分化,该过程可能通过调控Wnt/β-Catenin信号通路实现.