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靶向mdr1基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定
引用本文:干惠珠,张桂珍,张凤春,卜丽莎,杨绍娟,高申,郑德明.靶向mdr1基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定[J].蚌埠医学院学报,2007,32(4):384-387.
作者姓名:干惠珠  张桂珍  张凤春  卜丽莎  杨绍娟  高申  郑德明
作者单位:吉林大学中日联谊医院血液肿瘤科,吉林,长春,130031;吉林大学中日联谊医院中心研究室,吉林,长春,130031;上海交通大学医学部附属仁济医院,肿瘤科,上海,200001
基金项目:国家自然科学基金 , 吉林大学校科研和教改项目
摘    要:目的:设计并构建靶向mdr1基因shRNA真核表达质粒.方法:以mdr1为靶基因设计具有短发夹结构的模板寡核苷酸,退火形成互补双链结构,再克隆至pSilencerTM 3.1-H1 neo载体,构建重组的短发夹shRNA表达载体.采用酶切法和测序法鉴定.结果:经限制性内切酶酶切电泳后显示有66 bp模板寡核苷酸片段和4.3 kbp的线性化的pSilencerTM 3.1-H1 neo载体片段.重组子测序结果与Genebank中的mdr1基因cDNA序列相符.结论:重组靶向mdr1基因shRNA表达载体构建正确,为进一步转染耐药的肿瘤细胞逆转肿瘤耐药研究奠定了基础.

关 键 词:mdr1基因  RNA干扰  shRNA表达载体
文章编号:1000-2200(2007)04-0384-04
修稿时间:2006-09-25

Construction and identification of pSilencerTM 3.1-H1 neo mdr1 short hairpin RNA expression vectors
GAN Hui-zhu,ZHANG Gui-zhen,ZHANG Feng-chun,BU Li-sha,YANG Shao-juan,GAO Shen,ZHENG De-ming.Construction and identification of pSilencerTM 3.1-H1 neo mdr1 short hairpin RNA expression vectors[J].Journal of Bengbu Medical College,2007,32(4):384-387.
Authors:GAN Hui-zhu  ZHANG Gui-zhen  ZHANG Feng-chun  BU Li-sha  YANG Shao-juan  GAO Shen  ZHENG De-ming
Institution:1. Department of Oncology,2. Central Laboratory, China-Japan Union Hospital ,Jilin University, Changchun 130031 ; 3. Department of Oncology,Renji Hospital ,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200001, China
Abstract:
Keywords:mdr1 gene  RNA interference  shRNA expression vector
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