用A蛋白-过氧化物酶结合物作石蜡包埋组织内抗原的二步免疫酶染色

本文作者用葡萄球菌A蛋白-辣根过氧化物酶(SPA-HRP)结合物间接免疫染色技术,检测石蜡包埋组织切片中的细胞内免疫球蛋白及其他抗原,并与过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(PAP)、"标记的抗原"和过氧化物酶标记的抗体夹心法等技术作比较.用过碘酸钠法将A蛋白与HRP结合,酶与A蛋白的用量比例为2:1(10毫克HRP∶5毫克SPA).SPA-HRP间接酶染色二步法程序是:第一步用特异性抗血清处理,第二步再用SPA-HRP处理.脱蜡的切片用含0.5%H_2O_2的甲醇处理5分钟,以阻断粒细胞、单核巨噬细咆和红细胞的内源性过氧化物酶活性.每张切片经pH7.6的0.05M Tfis-HCl冲洗后,各用一种抗血清——兔抗人,α,γ,μ,δ,重