点特异突变对于人重组IL-6生物活性的影响

为了研究IL-6生物活性与蛋白质结构的关系,以及与活性有关的结构是否具有细胞特异性,建立了三组变异株:(1)rIL-6S变异株,4个天然存在的半胱氨酸被丝氨酸所取代;(2)在含有半胱氨酸的IL-6分子中建立一系列变异株,每个变异株内部都有40个氨基酸的缺失,这样在人类IL-6分子184个氨基酸中建立了一系列从N 端第4到第183氨基酸彼此相互连接的缺失变异株(rIL-6_(△4-23),rIL-6_(△24-43…));(3)在不含半胱氨酸的IL-6中第4～23氨基酸的缺失(rIL-6S_(△4-23))。然后用小鼠杂交细胞瘤增殖、EB 病毒转化人B 细胞系IgM的分泌、大鼠肝细胞纤维蛋白原分泌以及人类肝细胞纤维蛋白原分泌等试验来分析每种变异株的变异与活性的关系。