体外培养拟胚体条件的探讨 |
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引用本文: | 张良,黄冰,唐仕波,郭芬芬. 体外培养拟胚体条件的探讨[J]. 中国病理生理杂志, 2004, 20(4): 700-702 |
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作者姓名: | 张良 黄冰 唐仕波 郭芬芬 |
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作者单位: | 1. 中山大学中山眼科中心, 广东 广州 510060; 2. 中山大学实验动物中心, 广东 广州 510089 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(No.30070803),国家杰出青年基金资助项目(No.30125041) |
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摘 要: | 目的: 探讨体外拟胚体培养中获得优质拟胚体的条件。方法:分别使用6种EB培养液:(1)添加5%胎牛血清;(2)添加10%胎牛血清;(3)添加15%胎牛血清;(4)添加20%胎牛血清;(5)添加25%胎牛血清;(6)添加20%胎牛血清和0.1 mmol/L β-巯基乙醇。将ES细胞复苏后直接作EB培养和传代后再作EB培养,观察拟胚体生长的情况,并对各培养液中的胚体形成率和活细胞比率使用SPSS统计软件包进行统计学分析。结果:20%胎牛血清浓度和β-巯基乙醇的EB培养液胚体形成率最高,与其他培养液比较,差异显著(P<0.05),小胚体和结构松散胚体更多见于低血清浓度培养液,但各培养液中活细胞比率差异无显著。ES细胞复苏后经1代传代后作EB培养与复苏直接作EB培养,胚体形成率更高,差异显著(P<0.05),而活细胞比率差异无显著。另外,观察中发现,充分摇动不仅能保证细胞悬浮培养,而且可以防止胚体过早分化。结论:提供足够细胞营养,使用传代后代细胞作EB培养以及悬浮培养是获得较好细胞活力拟胚体的重要保证。
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关 键 词: | 干细胞 胚胎 细胞培养 |
文章编号: | 1000-4718(2004)04-0700-03 |
收稿时间: | 2002-10-23 |
Culture condition for the embryonic bodies in vitro |
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Abstract: | |
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Keywords: | Stem cells embryo Cells culture |
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