| EMA-RTQ-PCR快速鉴别沙门菌死活细胞方法的建立 |
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| 引用本文： | 余秋阳,欧阳效鹏,尚静晔,刘祥,余倩.EMA-RTQ-PCR快速鉴别沙门菌死活细胞方法的建立[J].现代预防医学,2015,0(12):2226-2229. |
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| 作者姓名： | 余秋阳 欧阳效鹏 尚静晔 刘祥 余倩 |
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| 作者单位： | 1.四川大学华西公共卫生学院（华西第四医院），四川 成都 610041；2.苏州工业园区疾病防治中心，浙江 苏州 215021；3.四川省疾病预防控制中心，四川 成都 610041；4.天津市产品质量监督检测技术研究院，天津 300384 |
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| 摘 要： | 摘要:目的 利用EMA（Ethidium Monoazide）能选择性与死细胞DNA非可逆共价结合的特性，建立EMA-RTQ-PCR方法快速鉴别沙门菌死活细胞。方法 选择300 μl、3.3×108 CFU/ml沙门菌灭活条件；检测RTQ-PCR的灵敏度与特异性；选择能抑制3.3×108 CFU/ml死细胞DNA扩增的EMA浓度，观察该浓度EMA对活菌扩增的影响。结果 灭活条件为65℃、10 min；RTQ-PCR检测沙门菌的灵敏度为25 CFU，特异性好；30 μg/ml的EMA可抑制3.3×108 CFU沙门菌死细胞DNA的扩增；30 μg/ml的EMA对活菌扩增的影响可通过离心消除；活菌数/死菌数≥40%时，可以检出活菌；当活菌数量足够大时，死菌的存在不影响实验结果。结论 本研究建立的快速鉴别沙门菌死活细胞EMA-RTQ-PCR方法可行，能有效避免单纯PCR检测沙门菌产生的假阳性结果。
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| 关 键 词： | 关键词:叠氮溴化乙锭（EMA） 实时荧光聚合酶链反应（RTQ-PCR） 沙门菌 活细胞 |
The establishment of an EMA-RTQ-PCR-based method for rapid identification of viability of Salmonella cells |
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| YU Qiu-yang,OU YANG Xiao-peng,SHANG Jing-ye,LIU Xiang,YU Qian.The establishment of an EMA-RTQ-PCR-based method for rapid identification of viability of Salmonella cells[J].Modern Preventive Medicine,2015,0(12):2226-2229. |
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| Authors: | YU Qiu-yang OU YANG Xiao-peng SHANG Jing-ye LIU Xiang YU Qian |
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| Institution: | *West China School Of Public Health, NO.4 West China Teaching Hospital, Sichuan University, Chengdu, Sichuan 610041, China |
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| Keywords: | - |
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