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| 表达人骨形成蛋白4的非复制型腺病毒的构建与鉴定 | |
| 引用本文： | 王兴宇,汪春兰,赵宇,王帮河,姚远,朱华锋,何金生.表达人骨形成蛋白4的非复制型腺病毒的构建与鉴定[J].中国修复重建外科杂志,2007,21(4):396-400. |
| 作者姓名： | 王兴宇 汪春兰 赵宇 王帮河 姚远 朱华锋 何金生 |
| 作者单位： | 1. 安徽医科大学第一附属医院急诊外科,合肥,230022 2. 安徽医科大学第一附属医院整形外科,合肥,230022 3. 安徽医科大学免疫学教研室 |
| 摘 要： | 目的构建含有人骨形成蛋白4（human bone morphogenetic protein4,hBMP-4）的非复制型腺病毒表达载体pAdE/hBMP-4并检测其表达。方法酶切质粒pCS2（＋）/hBMP-4获得目的基因片段,克隆至真核表达载体pcDNA3.1（＋）,再亚克隆至pShuttle-CMV,电转化至含有pAdEasy-1骨架质粒的E.coliBJ5183/p中进行同源重组,重组质粒转染HEK293细胞包装成含有hBMP-4基因的非复制型腺病毒。病毒颗粒感染HEK293和HeLa细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western-blot检测。结果获得了含有目的基因hBMP-4的非复制型腺病毒表达载体pAdE/hBMP-4,酶切鉴定提示构建正确,RT-PCR检测到hBMP-4基因的转录,Western-blot检测到hBMP-4蛋白表达。结论将目的基因hBMP-4克隆至非复制型腺病毒表达载体中,为进一步研究其在基因治疗骨缺损中的应用奠定基础。 |
| 关 键 词： | 骨形成蛋白4 非复制型腺病毒 基因治疗 |
| 修稿时间： | 2006-05-25 |
CONSTRUCTION AND IDENTIFICATION OF REPLICATION-DEFECTIVE RECOMBINANT ADINOVIRUS EXPRESSING HUMAN BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 4 |
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| WANG Xingyu, WANG Chunlan, ZHAO Yu,et al..CONSTRUCTION AND IDENTIFICATION OF REPLICATION-DEFECTIVE RECOMBINANT ADINOVIRUS EXPRESSING HUMAN BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 4[J].Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery,2007,21(4):396-400. | |
| Authors: | WANG Xingyu WANG Chunlan ZHAO Yu |
| Institution: | Department of Plastic Surgery, First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei Anhui , 230022, P. R. China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Bone morphogenetic protein 4 Replication-defective recombinant adinovirus Genetherapy |
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