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hTERT启动子调控的腺病毒载体的构建及在前列腺癌细胞中的表达
引用本文:张勇,吴建辉,黎玮,蔡文清. hTERT启动子调控的腺病毒载体的构建及在前列腺癌细胞中的表达[J]. 中华实验外科杂志, 2005, 22(1): 23-24,i001
作者姓名:张勇  吴建辉  黎玮  蔡文清
作者单位:050000,石家庄,河北医科大学第二医院泌尿外科
摘    要:目的 构建人端粒酶逆转录酶 (hTERT )启动子调控的表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的腺病毒系统 ,并研究其在前列腺癌细胞株PC 3中的表达。方法 构建带有hTERT启动子的腺病毒穿梭载体pDC3 15 Tp EGFP ,细胞重组技术获得腺病毒AdhTERT EGFP ,体外转染PC 3及人胚肺成纤维细胞株MRC 5 ,通过RT PCR和倒置荧光显微镜分别在mRNA和蛋白质水平检测EGFP的表达。带有小鼠巨细胞病毒 (mCMV)启动子的腺病毒Ad EGFP作为阳性对照。结果 成功构建出腺病毒AdhTERT EGFP ,滴度为 4.2× 10 9空斑形成单位 (pfu) /ml,分别转染PC 3和MRC 5 ,前者表达EGFP的阳性细胞数为 (66.4% 3 .3 ) % ,而后者不表达EGFP(P <0 .0 1) ;对照病毒Ad EGFP在PC 3和MRC 5中分别有 (88.1± 2 .2 ) %及 (89.2± 3 .1) %的细胞表达EGFP ,两者表达量差异无统计学意义。结论 该腺病毒系统中hTERT启动子调控下游基因可选择性地在前列腺肿瘤细胞中表达 ,在正常细胞中不表达 ,具有明显的靶向性。

关 键 词:表达量 EGFP 腺病毒载体 PC-3 前列腺癌细胞 hTERT启动子 调控 体外转染 增强型绿色荧光蛋白 RNA

Construction and expression in prostatic carcimona of an adenovirus vector driven by human telomerase reserve transcriptase gene promotor
ZHANG Yong,LI Wei,CAI Wen qing. Construction and expression in prostatic carcimona of an adenovirus vector driven by human telomerase reserve transcriptase gene promotor[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2005, 22(1): 23-24,i001
Authors:ZHANG Yong  LI Wei  CAI Wen qing
Affiliation:ZHANG Yong,LI Wei,CAI Wen qing.Department of Urology*,The Second Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050000,China
Abstract:
Keywords:Adenovirus vector  Telomerase  Prostatic carcinoma  Gene therapy  
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