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埃博拉病毒NP抗原表位区段的克隆和表达
引用本文:王晓丹,李鹏飞,冯晓燕,朱翠侠,阙海萍,张旭辉,刘志强,段翠密,修冰水,张贺秋. 埃博拉病毒NP抗原表位区段的克隆和表达[J]. 军事医学科学院院刊, 2014, 0(9)
作者姓名:王晓丹  李鹏飞  冯晓燕  朱翠侠  阙海萍  张旭辉  刘志强  段翠密  修冰水  张贺秋
作者单位:军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
基金项目:国家科技重大专项资助项目(2013ZX10004-803);国家科技重大专项资助项目
摘    要:目的分析埃博拉病毒核蛋白( NP)抗原表位,克隆表达埃博拉病毒NP抗原,为免疫学诊断试剂的研究奠定基础。方法采用BioSun生物学软件预测分析埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位区间,采用大肠杆菌优势密码子反向翻译成基因序列,采用PCR退火合成法合成NP优势密码子抗原基因,并利用载体pBVIL1进行克隆表达。采用间接ELISA技术评价获得NP抗原的特异性。结果确定埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位位于360~739 aa,共设计36条引物,扩增合成1140 bp的NP抗原基因,克隆表达后,融合蛋白相对分子质量为58×103,测序结果显示插入的NP基因正确。初步结果显示,NP抗原的特异性为99.24%(130/131)。结论获得埃博拉病毒NP抗原,为进一步研制特异的埃博拉病毒快速诊断试剂提供了抗原储备。

关 键 词:埃博拉病毒  核蛋白  抗原表位区段  表达

The cloning and expression of nucleoproteins (NP) of Ebola virus
WANG Xiao-dan,LI Peng-fei,FENG Xiao-yan,ZHU Cui-xia,QUE Hai-ping,ZHANG Xu-hui,LIU Zhi-qiang,DUAN Cui-mi,XIU Bing-shui,ZHANG He-qiu. The cloning and expression of nucleoproteins (NP) of Ebola virus[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2014, 0(9)
Authors:WANG Xiao-dan  LI Peng-fei  FENG Xiao-yan  ZHU Cui-xia  QUE Hai-ping  ZHANG Xu-hui  LIU Zhi-qiang  DUAN Cui-mi  XIU Bing-shui  ZHANG He-qiu
Abstract:
Keywords:Ebola virus  nucleoprotein  epitope  expression
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