| 人心脏发育相关基因ZNF382的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 罗开梅,冷波,张国广,马旭东.人心脏发育相关基因ZNF382的原核表达及多克隆抗体的制备[J].第三军医大学学报,2010,32(11). |
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| 作者姓名： | 罗开梅 冷波 张国广 马旭东 |
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| 作者单位： | 1. 漳州,漳州师范学院生物科学与技术系,福建,363000
2. 漳州,福建省漳州市医院血液科,福建,363000 |
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| 基金项目： | 福建省教育厅科技项目，卫生部科学研究基金--福建省卫生教育联合攻关计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 表达、纯化ZNF382融合蛋白及制备兔多克隆抗体.方法 通过PCR扩增ZNF382编码区,将其克隆到pRSET C载体中,重组载体酶切鉴定,测序,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG进行诱导表达,原核表达产物经鉴定、纯化后,免疫新西兰大白兔.通过ELISA和Western blot检测抗血清的效价和特异性.结果 成功构建了pRSET C-ZNF382原核表达重组质粒,His6-ZNF382融合蛋白被强烈诱导表达,以包涵体的形式存在,其相对分子质量约为 64×103,纯化后免疫产生的多克隆抗体效价约为1∶10 000,与ZNF382原核表达蛋白特异性结合.结论 获得了大量高效价、高特异性的兔抗人ZNF382多克隆抗体.
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| 关 键 词： | 心脏发育 原核表达 抗体制备 |
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