| 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP3的克隆化研究 |
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| 引用本文： | 刘研,杨倩,成军,王建军,纪冬,王春花,党晓燕,张玲霞.丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP3的克隆化研究[J].解放军医学杂志,2004,29(5):383-385. |
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| 作者姓名： | 刘研 杨倩 成军 王建军 纪冬 王春花 党晓燕 张玲霞 |
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| 作者单位： | 100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心 |
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| 基金项目： | 军队回国留学人员启动基金 (编号 98H0 38)，国家自然科学基金攻关项目 (编号C0 30 1 1 4 0 2 0 ,C30 0 70 689)，军队“九五”科技攻关项目 (编号98D0 63)，军队“十五”科技攻关青年基金项目 (编号 0 1Q1 38)资助课题 |
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| 摘 要： | 目的 筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活新型靶基因。方法 以HCV NSSA表达质粒pcDNA3．1(-)-NSSA转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3．1(-)为平行对照，提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析，应用生物信息学方法对所获基因片段序列进行分析发现，其中有新型基因片段，与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性。通过序列同源性搜索、比对和电子拼接，根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列，确定新型基因序列。从转染了pcDNA3．1(-)-NS5A的HepG2细胞提取总RNA，以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增，获得阳性克隆之后，进行鉴定并对克隆的基因及其编码产物的序列进行分析。结果 该新基因的编码序列全长为1572nt，编码产物由524aa组成，并测序证实，命名为NS5ATP3，在GentBank中注册，注册号为AF529364。结论 分子生物学技术与生物信息学技术相结合，发现并鉴定、克隆了HCV NSSA反式激活作用的新型靶基因NS5ATP3，为进一步研究HBxAg反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础。
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 丙型 非结构蛋白 NS5A 反式激活 基因克隆化 |
| 修稿时间： | 2003年8月8日 |
Cloning and identification of human gene 3 transactivated by nonstructural protein 5A of hepatitis C virus |
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| Liu Yan,Yang Qian,Cheng Jun et al. Gene Therapy Research Center.Cloning and identification of human gene 3 transactivated by nonstructural protein 5A of hepatitis C virus[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2004,29(5):383-385. |
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| Authors: | Liu Yan Yang Qian Cheng Jun Gene Therapy Research Center |
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| Institution: | Liu Yan,Yang Qian,Cheng Jun et al. Gene Therapy Research Center,Institute of Infectious Diseases,302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis C virus NS5A protein transactivation gene cloning |
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