| 桥粒芯胶蛋白3前导肽基因的克隆和原核表达 |
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| 引用本文： | 王飞,潘永正,李光富,David R.Garrod. 桥粒芯胶蛋白3前导肽基因的克隆和原核表达[J]. 东南大学学报(医学版), 2004, 23(5): 287-290 |
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| 作者姓名： | 王飞 潘永正 李光富 David R.Garrod |
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| 作者单位： | 东南大学附属中大医院,皮肤科,江苏,南京,210009;南京医科大学,病原生物学系,江苏,南京,210029;英国蔓彻斯特大学,生物学系,蔓彻斯特,英国 |
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| 基金项目： | 江苏省回国人员科研基金资助项目 (7690 0 0 4 0 2 5)，东南大学科研基金资助项目 (92 4 7341 1 71 ) |
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| 摘 要： | 目的：克隆人桥粒芯胶蛋白3前导肽(Dc3p)基因，并进行表达、纯化和鉴定。方法：用PCR法从桥粒芯胶蛋白(Dc)cDNA文库中扩增出Dc3p基因，与pGEX-4T-2载体连接成重组表达质粒pGEX-4T-2／Dc3p；重组质粒转入B121大肠杆菌：经诱导表达谷胱甘肽S-转移酶-Dc3p(GST-De3p)融合蛋白，该蛋白经Glutathione Sepharose4B亲和层析柱纯化，SDS-PAGE和免疫印迹法检测鉴定。结果：经酶切及序列分析鉴定，重组质粒pGEX-4T-2／De3p成功构建，诱导后高表达GST-De3p融合蛋白并得到纯化，免疫印迹法证实表达蛋白为Gsr-Dc3p。结论：获得高表达、高纯度的GST-Dc3p融合蛋白，为De3p的功能及免疫学分析打下基础。
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| 关 键 词： | 桥粒 桥粒芯胶蛋白3 基因克隆 基因表达 |
| 文章编号： | 1671-6264(2004)05-0287-04 |
| 修稿时间： | 2004-03-09 |
Cloning and expression of the precursor segment of desmocollin 3 in E.coli |
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| WANG Fei,PAN Yong-zheng,LI Guang-fu,David R. Garrod. Cloning and expression of the precursor segment of desmocollin 3 in E.coli[J]. Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed, 2004, 23(5): 287-290 |
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| Authors: | WANG Fei PAN Yong-zheng LI Guang-fu David R. Garrod |
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| Affiliation: | WANG Fei1,PAN Yong-zheng1,LI Guang-fu2,David R. Garrod3 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | desmosome desmocollin 3 gene cloning gene expression |
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