| 河弧菌Taqman实时荧光PCR检测方法建立 |
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| 引用本文： | 贾清,王淑京,汪春翔,马韶辉,阚飙,王多春.河弧菌Taqman实时荧光PCR检测方法建立[J].中国公共卫生,2011,27(3). |
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| 作者姓名： | 贾清 王淑京 汪春翔 马韶辉 阚飙 王多春 |
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| 作者单位： | 1. 青海省疾病预防控制中心检验检测中心细菌科,西宁,810007
2. 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家"863"高技术研究发展计划课题，国家自然科学基金，传染病重大专项 |
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| 摘 要： | 目的 建立以Taqman实时PCR检测河弧菌的方法.方法 根据河弧菌toxR基因的保守序列设计引物和Taqman探针,建立检测河弧菌的实时PCR方法;对引物和探针的浓度进行优化,对优化后建立的方法分别进行实验室内的灵敏度和特异性评价,并与常规PCR比较.结果 建立了检测河弧菌的实时PCR方法,经优化该方法选择引物的浓度为100 nmol/L,探针浓度为200 nmol/L;该方法对纯菌的检测下限为4.17×102cfu/mL,比常规PCR高1000倍;针对toxR基因建立的河弧菌实时PCR方法,对8种其他弧菌和肠道细菌的染色体无扩增.结论 建立的方法能够特异和敏感地检测河弧菌,可用于河弧菌的快速筛检.
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| 关 键 词： | 河弧菌 实时荧光PCR 检测方法 |
Detection of Vibrio fluvialis with Taqman real-time PCR assay |
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