| 壳聚糖纳米颗粒作为基因载体的初步研究 |
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| 引用本文： | 安江洪,敖绪军,钱莘,卓文磊,孙建国,陈正堂.壳聚糖纳米颗粒作为基因载体的初步研究[J].医学研究生学报,2008,21(8). |
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| 作者姓名： | 安江洪 敖绪军 钱莘 卓文磊 孙建国 陈正堂 |
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| 作者单位： | 第三军医大学附属新桥医院肿瘤科,重庆,400037 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的:采用适当粒径大小的壳聚糖纳米颗粒(CS-NP)连接质粒DNA,观察CS-NP结合DNA的能力及介导基因转染的效率.方法:利用静电吸附作用连接CS-NP与报告基因pEGFP-N1,形成pEGFP-N1-CS-NP复合物.用透射电镜及激光粒度分析仪观察pEGFP-N1-CS-NP的形态、粒径大小、分布及Zeta电位.用琼脂糖凝胶电泳分析CS-NP与DNA结合能力,以比色法检测其包封率;用DNase I消化实验观察pEGFP-N1-CS-NP抗核酸酶降解的能力.体外转染A549细胞观察pEGFP-N1-CS-NP的转染活性.结果:激光粒度分析仪及透射电镜观察到pEGFP-N1-CS-NP呈较均匀的不规则球形,平均粒径约为100～200nm,Ztea电位为16～22.8mV.WCS-NP/WDNA≥4时,能有效地结合DNA,包封率＞90%.CS-NP能有效介导pEGFP-N1转染A549细胞,并在A549细胞中表达绿色荧光蛋白.结论:CS-NP能有效地与质粒连接,并有很高的包封率,能保护DNA免受核酸酶的降解.CS-NP在体外能将报告基因转染入细胞内,并在细胞内表达.这些研究结果为采用CS-NP作为基因载体应用于活细胞及活体成像的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 壳聚糖 纳米颗粒 基因载体 |
Chitosan-DNA nanoparticles as gene carriers |
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| AN Jiang-hong,AO Xu-jun,QIAN Shen,ZHUO Wen-lei,SUN Jian-guo,CHEN Zheng-tang.Chitosan-DNA nanoparticles as gene carriers[J].Bulletin of Medical Postgraduate,2008,21(8). |
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| Authors: | AN Jiang-hong AO Xu-jun QIAN Shen ZHUO Wen-lei SUN Jian-guo CHEN Zheng-tang |
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| Institution: | AN Jiang-hong,AO Xu-jun,QIAN Shen,ZHUO Wen-lei,SUN Jian-guo,CHEN Zheng-tang(Institute of Cancer Research,Xinqiao Hospital,the Third Military Medical University,Chongqing 400037,China) |
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| Abstract: | Objective:To load the appropriate chitosan nanoparticle(CS-NP) with plasmid DNA and observe their binding capability and transfection efficiency in vitro.Methods:CS-NP were loaded with pEGFP-N1 plasmid DNA as the report gene through static electricity absorption.The diameter,diametric distribution and morphology of the pEGFP-N1-CS-NP were measured with the transmission electron microscope and the laser particle size analysis apparatus.The binding capability of pEGFP-N1 was evaluated by agrose gel electropho... |
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| Keywords: | Chitason Nanoparticle Gene carrier |
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