经活化SAPK/JNK和ERK1/2激酶途径上调单核细胞趋化蛋白1表达在介导血管紧张素Ⅱ促进大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的分子机制及生物学功能。方法按指定时间,给予不同浓度AngⅡ处理原代培养大鼠VSMC,运用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)研究AngⅡ对平滑肌细胞增殖的影响,并用MCP-1受体抑制剂(RS102895)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)拮抗剂氯沙坦预处理细胞,观察MCP-1是否参与AngⅡ的促增殖作用;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测MCP-1mRNA和培养基中的MCP-1蛋白含量,并用氯沙坦干预,观察氯沙坦是否具有抗炎作用;免疫印迹法观察不同时间细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径对MCP-1表达的影响。结果 AngⅡ(1μmol/L)作用48h明显促进平滑肌细胞增殖,MCP-1受体抑制剂(RS102895)能抵消该作用。在一定时间内,不同浓度的AngⅡ均上调MCP-1mRNA和蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01),氯沙坦能抵消AngⅡ的上调作用(均P<0.05)。与AngⅡ(1μmol/L)单独孵育12h比较,AngⅡ(1μmol/L)+氯沙坦(10μmol/L)明显抑制SAPK/JNK(0.581±0.037比1.143±0.012)、ERK1/2激酶(0.062±0.020比0.342±0.098,均P<0.05)活化,差异均有统计学意义。此外,SAPK/JNK激酶抑制剂(SP600125)和ERK1/2激酶抑制剂(U0126)分别抑制SAPK/JNK和ERK1/2激酶活性并下调MCP-1表达(P<0.05或P<0.01)。结论 AngⅡ通过AT1R,活化SAPK/JNK和ERK1/2激酶途径上调大鼠VSMCMCP-1的表达,并且MCP-1在一定程度上介导AngⅡ的促平滑肌细胞增殖。