| Alzheimer病Aβ1-42肽和IL-4双基因表达质粒的构建和表达鉴定 |
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| 作者姓名： | 倪兵 杨日高 黎万玲 姜曼 李艳秋 范文辉 吴玉章 |
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| 作者单位： | 第三军医大学,基础医学部全军免疫学研究所,重庆,400038;解放军第322医院外三科,大同,037006;第三军医大学,西南医院神经内科,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的构建Alzheimer病Aβ1-42基因和小鼠IL-4共表达质粒,探讨其作为Alzheimer病特异疫苗的可能性.方法全基因合成Aβ1-42基因片段并克隆入pMD18-T载体中,再从Aβ1-42/pMD18-T重组质粒中切下Aβ1-42基因并克隆入TA-CE5真核双表达载体中,构建重组质粒Aβ1-42/TACE5.从pUMMV-mIL4质粒中切下mIL-4并克隆到重组质粒Aβ1-42/TACE5中,构建双表达重组质粒Aβ1-42/mIL-4/TACE5测序鉴定克隆基因的正确性.脂质体试剂Lipofectamine 2000体外转染Aβ1-42/mIL-4/TACE5重组质粒于BHK-21细胞中,用ECL-Western-blot方法鉴定mIL-4和Aβ1-42能在该细胞中共表达.结果正确构建了Aβ1-42/mIL-4/TACE5双表达重组质粒,并且在转化此质粒的BHK-21细胞中检测出了Aβ1-42和mIL-4的表达.结论 双表达重组质粒Aβ1-42/mIL-4/TACE5基本可以满足其作为Alzheimer病特异的候选DNA疫苗的要求,为下一步的基因疫苗转基因动物体内免疫学实验提供了实验依据.
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| 关 键 词： | Alzheimer病 Aβ1-42 mIL-4 基因疫苗 |
| 文章编号： | 1000-5404(2004)15-1325-05 |
| 修稿时间： | 2004-03-02 |
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