| 人乳头瘤病毒16型野毒株L1-E7融合基因重组腺病毒载体构建及在293细胞中表达嵌合病毒样颗粒的研究 |
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| 引用本文： | 卞继峰,于修平,赵蔚明,杨海宁,王芸,胡海燕,周亚滨,贾继辉,栾怡,齐眉,耿昭. 人乳头瘤病毒16型野毒株L1-E7融合基因重组腺病毒载体构建及在293细胞中表达嵌合病毒样颗粒的研究[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2001, 21(4): 368-372 |
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| 作者姓名： | 卞继峰 于修平 赵蔚明 杨海宁 王芸 胡海燕 周亚滨 贾继辉 栾怡 齐眉 耿昭 |
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| 作者单位： | 山东大学医学院分子生物学实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（39670038）; 山东省自然科学基金（Y96C10042）资助项目 |
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| 摘 要： | 目的制备人乳头瘤病毒HPV16L1-E7重组腺病毒，以期获得防治宫颈癌的重组腺病毒减毒活疫苗。方法以HPV16型的野毒株HPV16-114/K为模板，利用PCR克隆技术制备HPV16L1-E7融合基因pUC19L1-E7，含L1的1～301氨基酸（AA）和E7的1～60AA的编码DNA序列；并转入腺病毒穿梭质粒pCA14L1-E7，与腺病毒质粒pBHG10共转染293细胞，筛选重组腺病毒rAd5HPV16L1-E7。以PCR、ELISA和Westernblot方法鉴定重组病毒及其表达的L1-E7蛋白，密度梯度超速离心纯化HPV16嵌合L1-E7VLP，电镜观察VLP的形态结构。结果PCR-DNA序列分析表明成功构建了HPV16L1-E7重组质粒pUC19L1-E7；并获得HPV16重组腺病毒rAd5HPV16L1-E7，在293细胞中可高效表达L1-E7蛋白，并形成嵌合病毒样颗粒（cVLP）。结论构建的重组腺病毒rAd5HPV16L1-E7可有效表达HPV16L1-E7cVLP，可进一步用于动物实验，研究其在防治宫颈癌中的作用。
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| 关 键 词： | 乳头状瘤病毒 病毒样颗粒 腺病毒载体 疫苗 宫颈肿瘤 宫颈癌 |
| 修稿时间： | 2000-03-01 |
Construction of an attenuated recombinant adenoviral vaccine of human papillomavirus type 16 L1-E7 and expression of the chimeric virus-like particles in 293 cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Papillomavirus Virus like particle Adenovirus vector Vaccine Cervical neoplasms |
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