激活蛋白-1对香烟烟雾提取物诱导气道 黏蛋白5AC基因表达的调控作用

目的：了解激活蛋白-1（AP-1）参与调控香烟烟雾诱导的气道黏蛋白（MUC）5AC表达的作用机制，探讨此过程中AP-1活化的可能信号途径。 方法：体外培养人气道上皮细胞BEAS-2B，给予香烟烟雾提取物（CSE）刺激，干预实验用c-Jun 的显性负性突变体TAM67转染细胞阻断AP-1的DNA结合活性；用SP600125和PD98059预处理分别阻断c-Jun氨基端激酶（JNK）和细胞外信号调节激酶（ERK）的活性。以ELISA法检测MUC5AC蛋白含量，Western印迹检测磷酸化JNK（p-JNK）、磷酸化ERK（ p-ERK）和磷酸化P38（ p-P38）含量，RT-PCR检测MUC5AC mRNA 表达水平， EMSA测定AP-1的 DNA结合活性。 结果：CSE（1 g/L）刺激后MUC5AC mRNA表达水平和蛋白含量明显高于对照组（均P＜0.01），AP-1 的DNA结合活性也明显强于对照组（P＜0.01），伴随p-ERK和p-JNK蛋白含量显著增加，与对照组相比，差异有统计学意义（均P＜0.01），而P38含量无明显变化(P＞0.05)；与CSE组相比，TAM67转染细胞后MUC5AC mRNA表达水平和蛋白含量均显著降低 (P＜0.01)；与CSE组相比，用SP600125或PD98059处理细胞后可明显抑制AP-1的 DNA结合活性 (均P＜0.05)，并下调MUC5AC蛋白含量和mRNA的表达（均P＜0.05）。 结论：AP-1参与调控CSE诱导的气道MUC5AC基因表达的过程，此过程是由JNK和ERK信号转导通路激活AP-1，再由AP-1与MUC5AC启动子上AP-1 DNA反应元件结合后在转录水平上调MUC5AC的表达而实现的。

Regulatory mechanism of activator protein-1 on the expression of MUC5AC induced by cigarette smoke extract