慢性间歇性低氧大鼠肾组织差异蛋白的定量分析:基于TMT-PRM技术 |
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引用本文: | 魏敏,陈乃洁,李璟怡,刘丹,沈双宏,王丰,吴润华,陈沁.慢性间歇性低氧大鼠肾组织差异蛋白的定量分析:基于TMT-PRM技术[J].南方医科大学学报,2023(11):1857-1864. |
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作者姓名: | 魏敏 陈乃洁 李璟怡 刘丹 沈双宏 王丰 吴润华 陈沁 |
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作者单位: | 1. 福建中医药大学中西医结合学院;2. 福建中医药大学临床技能教学中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(82074192,81973666);;福建省自然科学基金(2020J01718);;广东省自然科学基金(2019A1515010816)~~; |
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摘 要: | 目的 基于TMT-PRM技术研究慢性间歇性低氧大鼠肾脏组织的蛋白质组学,筛选差异表达蛋白以鉴定潜在的生物标志物。方法 将20只SD大鼠随机分为正常组、实验组(n=10)。实验组放入低氧舱内建立慢性间歇性低氧(CIH)大鼠模型。12周后采集肾脏样本,HE染色观察大鼠肾组织形态变化;提取蛋白并酶解和TMT标记,采用LC-MS/MS鉴定蛋白,软件Proteome Discoverer2.4处理数据,进行生物信息学分析,以倍数变化1.2以上或低于0.83为标准,t检验P<0.05作为差异表达蛋白,并应用PRM技术验证候选蛋白的表达情况。结果 CIH引起肾脏损伤,肾小球形态不规则,肾小管上皮细胞肿胀等。实验组与正常组比较,筛选出差异表达蛋白有31种,其中表达上调的22种,表达下调的9种。GO功能富集分析显示差异表达蛋白主要参与细胞黏附、缺氧应激、钙离子等生物学过程。KEGG通路富集分析结果显示差异表达蛋白涉及PPAR、AMPK、代谢途径等信号通路。PRM相对定量分析的目标蛋白中进行筛选,P07379(PCK1)、P19132(Fth1)、Q5XI79(Ndufaf7)3个蛋白与TMT定量蛋...
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关 键 词: | 慢性间歇性低氧 肾脏 蛋白组学 TMT PRM |
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