狂犬病病毒滴度直接免疫荧光检测的优化及验证题录

目的对狂犬病病毒滴度直接免疫荧光检测(direct immunofluorescence assay, DFA)进行优化及验证, 使其更好地应用于规模化生产中的质量控制。方法采用不同的病毒培养温度(35、37 ℃)、培养时间(24、48 h)、接种细胞(Vero细胞、BSR细胞)以及稀释倍数(3、5、10倍)对狂犬病病毒滴度进行DFA, 并对病毒滴度结果进行统计学分析。对优化方法进行重复性和中间精密度验证, 并对多个批次样品采用小鼠颅内滴定法和DFA进行滴度检测, 分析其相关性。结果优化的条件为37 ℃培养24 h、接种BSR细胞、5倍系列稀释病毒。DFA重复性和中间精密度变异系数均小于2%。16份样品的小鼠颅内滴定法与DFA滴度显著相关, 相关系数为0.952, 且P值小于0.000 1。结论优化后的DFA快速、准确, 且与小鼠颅内滴定法一致性较好, 能够替代后者作为狂犬病疫苗规模化生产的质量控制方法。