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糖蛋白C6ORF120在CD4+T淋巴细胞凋亡中的作用研究
引用本文:李鑫,乔雍,常路丝,肖凡,卢联合,郝晓花,张仁雯,吴昊,魏红山. 糖蛋白C6ORF120在CD4+T淋巴细胞凋亡中的作用研究[J]. 中华医学杂志(英文版), 2011, 124(24)
作者姓名:李鑫  乔雍  常路丝  肖凡  卢联合  郝晓花  张仁雯  吴昊  魏红山
作者单位:首都医科大学附属北京地坛医院,Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University,Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University,Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University,Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University,Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University,Peking University Health Science Center,Beijing Youan Hospital, Capital Medical University,Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University
基金项目:The National Natural Science Foundation of China (General Program, Key Program, Major Research Plan)
摘    要:背景:在HIV感染过程中,尽管CD4+T凋亡和CD8+T细胞反应已经进行了广泛的研究,但HIV感染过程中CD4+T细胞凋亡信号究竟是如何启动的,至今尚未被阐述。本研究的目的在于探讨人类功能未知基因C6orf120的功能,阐述其在衣霉素细胞诱导CD4+T细胞凋亡中的可能作用。方法:从HIV感染者外周血单核细胞(PBMCs)中克隆C6orf120编码序列。将获得的DNA片段插入到pET-32a表达系统中,转化大肠杆菌E.coli,制备C6ORF120重组蛋白。采用磁珠分离法制备原代CD4+T和CD8+T细胞。原代T细胞在1 × 106 细胞/毫升条件下培养,并与0, 0.1, 1, 10, 100, 以及 200 ng/mL 的C6orf120重组蛋白共孵育48小时,然后收获细胞并进行细胞周期和凋亡分析。采用衣霉素诱导Jurkat细胞凋亡。采用内质网应激标志物GRp78和GADD对内质网应激进行评价。结果:本研究制备了C6ORF120重组蛋白及其多克隆抗体。免疫组织化学分析显示C6orf120主要表达与肝细胞和淋巴结生发中心的细胞。在0.1, 1, 10, 100, 以及 200 ng/mL浓度下,C6ORF120重组蛋白可以诱导CD4+T细胞凋亡,并增加Jurkat细胞的G2期。Western blot分析显示C6ORF120重组蛋白体外可以增加Jurkat细胞GRp78和GADD的表达。结论:研究结果提示,C6ORF120可以诱导CD4+T淋巴细胞的凋亡,其机制至少部分是通过诱导内质网应激实现的。

关 键 词:艾滋病   C6orf120   细胞凋亡   内质网,应激   细胞周期

Role of C6ORF120, an N-glycosylated protein, is implicated in apoptosis of CD4+T lymphocytes
Abstract:
Keywords:HIV/AIDS   C6orf120   apoptosis   endoplasmic reticulum stress   cell cycle
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