不同浓度γ干扰素诱导大鼠脾脏来源树突状细胞表达IDO的变化及对T淋巴细胞增殖的影响

背景：DC可通过产生吲哚胺-2 ,3-双加氧酶（IDO），抑制T淋巴细胞增殖诱导免疫耐受。因此，上调DC细胞的IDO表达可能成为诱导移植后免疫耐受的新策略。本研究的目的在于探讨不同浓度γ干扰素（IFN-γ）作用下大鼠脾脏来源的树突状细胞（DC）中吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）mRNA和蛋白表达的变化及IDO对同种异体T淋巴细胞增殖的影响。方法：应用细胞因子体外诱导培养大鼠脾脏来源DC，应用流式细胞仪测定大鼠DC特异性分子OX62和表面分子CD80、CD86的表达。分别用不同浓度（0、100、300、500U/ml）的IFN-γ诱导作用DC后，Real-time PCR测定DC中IDO mRNA的相对表达水平，Western Blot检测DC中IDO蛋白在DC中的表达水平。同种异体混合淋巴细胞反应（MLR）检测不同浓度IFN-γ诱导后的DC对同种异体T淋巴细胞增殖的影响。结果：体外诱导培养的DC光学显微镜下观察，具有典型的树枝状突起。OX62表达率达到80%以上，CD80、CD86的阳性表达也在80%左右；DC的IDO mRNA和蛋白的相对表达量随着IFN-γ作用浓度的增大逐渐增大，不同浓度组间差异有统计学意义（P<0.05）；各组IFN-γ作用后DC与对照组比较，T淋巴细胞的增殖率显著降低（P<0.05）；且随着IFN-γ作用浓度的增大T淋巴细胞的增殖率逐渐降低，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论：采用改良的培养黏附法体外成功地获得了纯度较高的大鼠脾脏来源的DC；IFN-γ可以诱导大鼠脾脏来源DC表面活性IDO的表达增加，减弱脾脏DC对同种T细胞增殖的刺激能力。

T-cell proliferation is inhibited by the induction of IDO in spleen-derived dendritic cells of rat