| A型流感病毒NP基因的克隆表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 袁子杰,陈晓丽.A型流感病毒NP基因的克隆表达与鉴定[J].实用预防医学,2009,16(1). |
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| 作者姓名： | 袁子杰 陈晓丽 |
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| 作者单位： | 湖南省长沙市中心医院,湖南,长沙,410004 |
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| 摘 要： | 目的 构建人A型流感病毒NP基因原核重组表达载体并在E.coli BL21(DE3)中表达.方法 从流感患者咽分泌物中提取总RNA,设计特异性引物,经RT-PCR得到NP基因开放阅读框cDNA后定向克隆到原核表达载体pET28b(+),构建含目的 基因的pET28b(+)-NP重组质粒,经酶切、PCR和测序正确后转化E.coli BL21(DE3),0.1mmol/L IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 ①成功构建了pET28b(+)-NP重组质粒;②在E.coli BL21(DE3)中表达了一分子量约55 kDa的融合蛋白,经Western blot鉴定正确.结论 重组质粒pET 28b(+)-NP构建成功并在E.coli BL21(DE3)中高效表达了人A型流感病毒NP蛋白,为后续该蛋白的功能研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | A型流感病毒 克隆 表达 |
Cloning of Human Influenza A Virus NP Gene and Construction of Its Prokaryotic Expression Vector |
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| YUAN Zi-jie,CHEN Xiao-li.Cloning of Human Influenza A Virus NP Gene and Construction of Its Prokaryotic Expression Vector[J].Practical Preventive Medicine,2009,16(1). |
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| Authors: | YUAN Zi-jie CHEN Xiao-li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NP |
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