重组乙酰胆碱受体α亚单位-BirA识别多肽序列基因的构建与表达 |
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引用本文: | 陈秋艳,孙昌元,姜京植,李英信,李红花,李芳芳,金权鑫,孟繁平.重组乙酰胆碱受体α亚单位-BirA识别多肽序列基因的构建与表达[J].延边医学院学报,2009,32(2):83-87. |
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作者姓名: | 陈秋艳 孙昌元 姜京植 李英信 李红花 李芳芳 金权鑫 孟繁平 |
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作者单位: | 延边大学基础医学院,免疫学与病原生物学教研部,吉林,延吉,133000
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基金项目: | 国家自然科学基金30460128,30760234,30860260 |
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摘 要: | 目的]构建重组乙酰胆碱受体亚单位-BirA识别多肽序列基因(pcDNA 3.1-AChR-αBirA),并对其进行真核基因表达.方法]设计引物生物素蛋白连接酶(BirA)识别多肽序列基因,将载体pcDNA3.1-AChR-αBirA识别多肽序列基因连接,并用EcoRⅤ单酶切检查BirA识别多肽序列基因插入的正确性,并测定序列进行验证.将构建成功的载体在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上进行表达,经激光扫描共聚焦显微镜验证其产物.结果]电泳检查可见大小为63 bp的条带,经测定序列验证了插入的基因序列为BirA识别多肽序列基因;转染后经激光扫描共聚焦显微镜观察到CHO细胞膜上的绿色荧光.结论]成功构建了AChR-αBirA识别多肽序列基因重组载体,并可在CHO细胞中较好地表达.
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关 键 词: | 重症肌无力 受体 胆碱能 重组 遗传 |
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