| 基于RT-PCR基础上的体内重组法构建人源性胶质瘤单链抗体库 |
| |
| 引用本文： | 王彦刚,章翔,费舟,张剑宁,付洛安,刘卫平,赵爱志,郭庆东,刘先珍.基于RT-PCR基础上的体内重组法构建人源性胶质瘤单链抗体库[J].第四军医大学学报,2002,23(23):2175-2178. |
| |
| 作者姓名： | 王彦刚 章翔 费舟 张剑宁 付洛安 刘卫平 赵爱志 郭庆东 刘先珍 |
| |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院全军神经外科研究所,陕西,西安,710033
2. 第四军医大学西京医院普通外科,陕西,西安,710033 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (39970 852 ) |
| |
| 摘 要： | 目的 构建人源性胶质瘤噬菌体抗体库 .方法 经逆转录、套式PCR从脑胶质瘤患者血淋巴细胞中扩增出抗体轻链Vκ 和重链VH 基因 .先构建Vκ 基因库 ,并使连接Vκ 和VH基因的Linker与Vκ 基因连接 ,再将VH 基因克隆入Vκ 基因库 ,即构建成约为 3.5× 10 6 的单链抗体 (ScFv)基因库 .以Loxp5 11序列替代Linker序列 ,并将ScFv克隆入pDNA5内进行重组、鉴定 ,得到新的ScFv噬菌体抗体库 .结果 表明原初级噬菌体抗体库经Cre Loxp5 11系统重组后库容量达到 8.5× 10 8,部分测序证实抗体基因与人源性抗体基因数据库同源 .结论 利用体内重组系统明显提高了所建的抗体库容量 ,为进一步筛选特异性人源性抗脑胶质瘤ScFv奠定了基础
|
| 关 键 词： | 胶质瘤 噬菌体抗体库 单链抗体 脑肿瘤 |
| 文章编号： | 1000-2790(2002)23-2175-04 |
| 修稿时间： | 2002年3月30日 |
Construction of phage library of human glioma single chain fragment variable region antibody by in vivo recombinaton based on RT-PCR |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | glioma phage antibody library single chain Fv gene recombination |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
