| 疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 刘生杰,朱茂英,陈德宇,吴超,倪庆胜,余为一.疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体制备及鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(6). |
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| 作者姓名： | 刘生杰 朱茂英 陈德宇 吴超 倪庆胜 余为一 |
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| 作者单位： | 阜阳师范学院生命科学学院;安徽农业大学安徽省人畜共患病重点实验室; |
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| 基金项目： | 安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2013A203);国家自然科学基金(31172306) |
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| 摘 要： | 目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体与疣鼻栖鸭组织MDIi的反应强度。结果成功构建了pET-32a/MDIi原核表达载体,诱导表达了相对分子质量(Mr)约40 000的包涵体形式的MDIi重组蛋白,免疫小鼠获得效价为1∶128 000的特异性多克隆抗体,抗体与疣鼻栖鸭组织中的MDIi反应滴度为1∶32 000。结论成功制备了高效价的特异性抗MDIi多克隆抗体,抗体与组织抗原有较强的免疫反应性。
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| 关 键 词： | 疣鼻栖鸭 恒定链 多克隆抗体 组织抗原 |
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