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shRNA沉默HBx下调HepG2.2.15细胞基质金属蛋白酶2的表达
引用本文:李长福,孙越鹏,耿磊,范芳.shRNA沉默HBx下调HepG2.2.15细胞基质金属蛋白酶2的表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(4).
作者姓名:李长福  孙越鹏  耿磊  范芳
作者单位:遵义医学院生化教研室;天津生物工程职业技术学院生物制药系;天津药业研究院有限公司;
基金项目:贵州省联合基金(黔科合J字LKZ[2011]33号);遵义市红花岗区科技基金[(2010)16]
摘    要:目的探讨HBx小发夹RNA(shRNA)对HepG2.2.15细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。方法采用psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞,反转录PCR评估沉默效率;MTT法检测转染后HepG2.2.15细胞增殖情况;实时定量PCR(qRT-PCR)检测MMP-2 mRNA表达;Western blot法检测MMP-2蛋白表达的变化。结果反转录PCR检测HBx基因的沉默效率为53.6%;MTT检测结果显示转染24、48、72 h后HepG2.2.15细胞的增殖受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞后,qRT-PCR和Western blot检测结果显示,HepG2.2.15细胞中MMP-2基因的mRNA水平和蛋白水平表达分别有不同程度的下调,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 RNA干扰技术抑制HepG2.2.15细胞中HBx基因的表达,可抑制细胞增殖,下调HepG2.2.15细胞中MMP-2的表达。

关 键 词:RNA干扰  HBx基因  HepG..细胞  MMP-
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