下调环指蛋白2的表达促进U87脑胶质瘤细胞凋亡并增强其放射敏感性 |
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作者姓名: | 周春辉 杨帆 席文锦 魏铭 郑国旭 王微 杨安钢 张剑宁 温伟红 |
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作者单位: | 海军总医院神经外科;第二军医大学研究生院;第四军医大学基础部免疫学教研室;第四军医大学西京医院泌尿外科; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81171924,81372225) |
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摘 要: | 目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF2的表达下调,用MTT法检测细胞增殖,用annexin V-FITC/PI标记结合流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况;经X射线照射后,用流式细胞术检测对照细胞和RNF2表达下调细胞的凋亡情况。结果 2条针对RNF2的shRNA均可有效抑制U87细胞中RNF2的表达。RNF2表达下调后,U87细胞的增殖受到显著抑制,S期细胞明显减少(shRNA-NC:27.31±1.35;shRNF2-1:16.72±2.90;shRNF2-3:10.35±1.33),G1期细胞显著增加(shRNA-NC:56.13±1.80;shRNF2-1:76.32±3.11;shRNF2-3:80.45±2.83),同时出现细胞凋亡。经X线照射后,RNF2下调的细胞凋亡率明显增加(shRNA-NC:20.88±0.64;shRNF2-1:39.69±0.57;shRNF2-3:47.82±0.45)。结论下调RNF2表达可明显抑制细胞生长,并增强U87细胞对放射的敏感性。
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关 键 词: | RNF 胶质瘤 RNA干扰 放射敏感性 |
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