pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用 |
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引用本文: | 胡东,杨小康,王婉,邢应如,王文洋,杜昭弘,尤其,章力,陈丽萍,吴静,张荣波.pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(11). |
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作者姓名: | 胡东 杨小康 王婉 邢应如 王文洋 杜昭弘 尤其 章力 陈丽萍 吴静 张荣波 |
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作者单位: | 安徽理工大学医学院免疫与检验教研室;安徽理工大学免疫与感染研究所;安徽理工大学附属肿瘤医院检验科; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(61170172,81202294,81172778,81302524);安徽省自然科学基金(1208085QH162,KJ2013A105);大学生创新创业训练计划项目(AH201310361188,AH201310361189,AH201310361190,201310361096) |
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摘 要: | 目的构建结核分枝杆菌Ag85B抗原基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的DNA疫苗,探究其抗结核分枝杆菌保护效应。方法构建pCMV-LC3-Ag85B重组质粒并转染RAW264.7细胞,Western blot法检测目的蛋白的表达水平。分别以pCMV、pCMV-Ag85B、pCMV-LC3-Ag85B质粒免疫BALB/c小鼠。末次免疫2周后,Ag85B刺激下培养各组小鼠脾脏淋巴细胞,ELISA检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌水平。末次免疫3个月后,用H37Rv标准株尾静脉注射感染小鼠,计数肺和脾脏结核分枝杆菌载量。结果 pCMV-LC3-Ag85B在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性。与pCMV-Ag85B免疫组相比,pCMV-LC3-Ag85B免疫组的IL-2、IFN-γ分泌显著增加,而肺和脾脏内结核分枝杆菌载量降低。结论 pCMV-LC3-Ag85B可显著增强Th1型免疫应答,并显示较好的抗结核分枝杆菌免疫保护效应。
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关 键 词: | 自噬 结核分枝杆菌 LC AgB 免疫保护 |
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