| LC3-LpqH自噬靶向性抗结核DNA疫苗的制备 |
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| 引用本文： | 胡东,杨小康,吴静,王干勋,王文洋,祁真玉,陈功,张荣波.LC3-LpqH自噬靶向性抗结核DNA疫苗的制备[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(6). |
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| 作者姓名： | 胡东 杨小康 吴静 王干勋 王文洋 祁真玉 陈功 张荣波 |
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| 作者单位： | 安徽理工大学医学院免疫与检验教研室免疫与感染研究所;淮南东方医院集团总院病理科; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(61170172,81202294,81172778);安徽省自然科学基金(1208085QH162);国家级大学生创新创业训练计划项目(201210361121,201210361112) |
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| 摘 要： | 目的制备结核杆菌脂蛋白抗原前体LpqH基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的抗结核DNA疫苗,探究其诱导与靶向自噬的效应。方法构建pCMV-LpqH与pCMV-LC3-LpqH重组质粒并转染RAW264.7细胞,免疫印迹法检测LC-3与LC3-LpqH的表达。转染pCMV-LpqH或pCMV-LC3-LpqH至GFP-LC3-RAW264.7细胞,免疫荧光法观察LC3-LpqH蛋白的定位。结果细胞转染pCMV-LpqH后LC-3表达水平增高。pCMV-LC3-LpqH在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性,并且LC3-LpqH与GFP-LC3体外表达后共定位于自噬体上。结论 pCMV-LC3-LpqH的表达能够增强自噬,并将LpqH抗原靶向定位于自噬体,为设计新型抗结核疫苗提供了新思路。
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| 关 键 词： | 自噬 结核分枝杆菌 LC LpqH 疫苗 |
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