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| 猪链球菌H因子结合蛋白截短体的表达、纯化及其结合人血清IgG的活性分析 | |
| 作者姓名： | 李雪琴 刘鹏 骈亚亚 郑玉玲 姜永强 袁媛 霍春月 |
| 作者单位： | 安徽医科大学研究生学院;军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室;首都医科大学燕京医学院; |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30870091) |
| 摘 要： | 目的构建带His标签的2型猪链球菌H因子结合蛋白(Fhb)截短表达片段Fhb-N(45-344aa)和Fhb-C(345-664aa)的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,获得高纯度的重组蛋白,鉴定其与人血清IgG(hIgG)结合的活性。方法以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩增目的片段,构建His-Fhb-N和His-Fhb-C重组表达质粒,利用亲和层析纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证。蛋白G亲和层析柱从健康人血清中纯化人IgG(hIgG),Western blot法和生物膜干涉(BLI)鉴定和分析His-Fhb与hIgG结合的活性。结果成功构建了带His标签的原核表达质粒并获得了His-Fhb-N和His-Fhb-C截短表达蛋白,验证出Fhb特异性地与hIgG结合,且结合区域位于Fhb-N(45-344aa)。结论 Fhb能够结合hIgG,结合区域位于Fhb-N。 |
| 关 键 词： | 型猪链球菌 Fhb 原核表达 人血清IgG |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |