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组织型纤溶酶原激活物重组腺病毒载体的构建及其转染ECV304细胞后对血管内皮细胞生长因子表达的影响
引用本文:段鹏飞,吴浩荣,肖璋生,李晓强.组织型纤溶酶原激活物重组腺病毒载体的构建及其转染ECV304细胞后对血管内皮细胞生长因子表达的影响[J].江苏医药,2011,37(10).
作者姓名:段鹏飞  吴浩荣  肖璋生  李晓强
作者单位:1. 苏州大学附属第二医院血管外科,215004
2. 苏州大学附属第二医院普通外科,215004
3. 浙江省宁波市鄞州人民医院肿瘤外科
基金项目:苏州市科技局社会发展科技计划项目
摘    要:目的 评估外源性组织型纤溶酶原激活物(t-PA)对ECV304细胞中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法 应用细菌内同源重组技术快速构建Adt-PA腺病毒重组质粒,转染不同病毒滴度Adt-PA至ECV304细胞,转染比率(MOI)分别为1∶10、1∶50、1∶100,选取合适MOI值;病毒转染后检测ECV304细胞内t-PA蛋白的表达.然后将培养的ECV304细胞分为二组,在培养液中加入Adt-PA混合培养24 h和48 h分别作为实验组1和实验组2,加入空病毒Ad混合培养48 h作为对照组,比较各组细胞中VEGF mRNA的转录和蛋白表达水平.结果 成功构建了重组腺病毒Adt-PA.当MOI为1∶50时,细胞转染效率为(69.6±21.2)%,且对ECV304细胞增殖具有一定的促进作用;Adt-PA转染ECV304细胞后在72 h内随着时间的延长其蛋白表达量逐渐升高(P<0.01);细胞内VEGFmRNA的转录水平和蛋白表达量在实验组1和2中较对照组均有明显升高(P<0.01).结论 构建的t-PA腺病毒表达载体可有效感染ECV304细胞并可显著增加其VEGF的表达水平.

关 键 词:组织型纤溶酶原激活物  腺病毒  血管内皮细胞生长因子

Construction of recombinant adenoviruse vector containing tissue-type plasminogen activator and its effect on the expression of VEGF in the transfected active ECV304 cells
DUAN Pengfei,WU Haorong,XIAO Zhangsheng,et al..Construction of recombinant adenoviruse vector containing tissue-type plasminogen activator and its effect on the expression of VEGF in the transfected active ECV304 cells[J].Jiangsu Medical Journal,2011,37(10).
Authors:DUAN Pengfei  WU Haorong  XIAO Zhangsheng  
Institution:DUAN Pengfei,WU Haorong,XIAO Zhangsheng,et al.Department of Vascular Surgery,Second Affiliated Hospital,Soochow University,Suzhou 215004,CHINA
Abstract:
Keywords:Tissue plasminogen activator  Adenovirus  Vascular endothelial growth factor  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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