| 摘 要： | 目的 探究谷氨酰胺(glutamine,Gln)对CD8+T细胞抗肿瘤免疫反应的影响及机制。方法 TCGA数据库分析肿瘤Gln代谢与浸润CD8+T细胞数量及功能的关系。利用CRISPR/Cas9敲低MC38细胞GLS表达，构建小鼠肿瘤模型。流式细胞术检测肿瘤增殖和凋亡，分析肿瘤浸润免疫细胞数量和功能。用Gln缺乏的培养基、完全培养基或添加GSH、RSL3的培养基分别处理CD8+T细胞，检测GSH含量，细胞凋亡，GPX4和Lipid-ROS及效应功能蛋白表达，并进行RNA-seq分析。结果 肿瘤Gln代谢与肿瘤浸润CD8+T细胞数量和功能负相关。敲低MC38细胞GLS表达抑制了C57BL/6肿瘤的生长及Ki67的表达，促进了Caspase3表达，提高了肿瘤浸润免疫细胞的数量，抑制了肿瘤浸润CD8+T细胞PD-1、TIM-3和LAG-3表达，并提高了CD8+T细胞CD137、CD107a、IFN-γ及TNF-α表达。RNA-seq结果显示，Gln缺乏后CD8+T细胞铁死亡相关基因TFRC、HMOX1、CYBB、SLC7A11表达上调。Gln缺乏后CD8+T细胞死亡增多、CD137、CD107a、IFN-γ、GSH和GPX4表达下调，Lipid-ROS表达上调；补充GSH后CD8+T细胞GPX4上调，Lipid-ROS下调，CD8+T细胞分泌的IFN-γ增多。结论 Gln缺乏诱导CD8+T细胞铁死亡抑制其效应功能。
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