香菇多糖LNT2的提取分离纯化、结构及体外抗肿瘤活性研究

目的 从香菇子实体中分离纯化得到精制香菇多糖，并对其结构和体外抗肿瘤活性进行研究。方法 采用碱提-醇沉法提取香菇粗多糖，并通过脱色、超滤分离纯化得到精制香菇多糖，命名为LNT₂。苯酚-硫酸法测定总糖量，高效凝胶色谱法测定相对分子质量，紫外光谱检测蛋白质和核酸，旋光度实验测定比旋光度。综合运用酸水解、高碘酸氧化、甲基化等化学分析法和傅里叶红外光谱、核磁共振光谱等光谱分析法对LNT₂的化学结构进行分析；通过刚果红实验对LNT₂的糖链构象进行考察；采用四甲偶氮唑盐（MTT）比色法测定LNT₂对小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞增殖的抑制率。结果 经测定香菇多糖LNT₂为均一组分多糖，其相对分子质量（M_W）为1.852×10⁵、含糖量为94.99%，比旋光度为+8.03°；紫外光谱显示LNT₂在280和260 nm处无吸收峰。综合化学分析和光谱分析推出LNT₂为β构型的葡聚糖，其主链由1-3连接的葡聚糖组成，分支点位于糖的6位，侧链由末端葡萄糖残基组成；刚果红实验表明LNT₂分子在较低浓度NaOH溶液中呈三螺旋构象。体外抗肿瘤实验表明LNT₂能显著抑制小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞的增殖，且呈量效依赖性。结论 精制香菇多糖LNT₂为均一相对分子质量的多糖组分，其结构为β构型1-3连接葡聚糖；初步表明LNT₂为三股螺旋结构，且具有一定的抗肿瘤活性，为其进一步的开发利用奠定了一定的基础。

Isolation, purification, structural elucidation, and antitumor activity in vitro of lentinan LNT2