| 蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化 |
| |
| 引用本文： | 王洋,余源,王卫亮,陈阳,慈雅丽,田喜凤,郑佳,杨志宏.蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化[J].中国人兽共患病杂志,2011,27(6):465-469. |
| |
| 作者姓名： | 王洋 余源 王卫亮 陈阳 慈雅丽 田喜凤 郑佳 杨志宏 |
| |
| 作者单位： | 王洋,余源,王卫亮,陈阳,慈雅丽,田喜凤,WANG Yang,YU Yuan,WANG Wei-liang,CHEN Yang,CI Ya-li,TIAN Xi-feng(河北联合大学生命科学学院,唐山,063000);郑佳,杨志宏,ZHENG Jia,YANG Zhi-hong(唐山市职业技术学校,唐山,063000) |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，河北省科技厅项目 |
| |
| 摘 要： | 目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT—PCR获得a-4贾第素基因片段，经双酶切连入原核表达载体pET-28a（＋），构建成为重组表达载体pET-28a（＋）-α-4，并转化大肠杆菌Rosetta（DE3）。IPTG诱导后，收集菌体，裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测，并用Ni—NTA亲和层析柱纯化融合蛋白。结果成功构建了原核表达载体pET-28a（＋）-α-4，经IPTG诱导后，在大肠杆菌中高效表达，目的蛋白以包涵体形式存在；SDS-PAGE及Western blot分析显示，在相对分子量约34kD的位置出现目的蛋白条带，与理论值相符；经Ni—NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-4贾第素融合蛋白。结论成功克隆、表达并纯化了α-4贾第素蛋白，为α-4贾第素的细胞定位及功能研究提供了必要条件。
|
| 关 键 词： | 蓝氏贾第鞭毛虫 α-4贾第素 原核表达 |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
