| 人细胞色素P450 1A2的异源表达及代谢活性测定 |
| |
| 引用本文： | 阮昊,陈枢青,姚彤炜. 人细胞色素P450 1A2的异源表达及代谢活性测定[J]. 中国现代应用药学, 2009, 26(9): 697-702 |
| |
| 作者姓名： | 阮昊 陈枢青 姚彤炜 |
| |
| 作者单位： | 浙江大学药学院，杭州 310058 |
| |
| 摘 要： | 目的获得单一的具有活性的人细胞色素P450 1A2（CYP1A2）重组酶,以进一步进行该酶参与的药物代谢研究。方法以人肝组织提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增全长的人类CYP1A2基因片段,插入转座载体pFastBac构建重组转座质粒pFastBac-CYP1A2,转化入DH10Bac大肠杆菌,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-CYP1A2,以之转染草地夜蛾细胞（Sf9）,与细胞色素氧化还原酶（CYPOR）进行共表达。利用蛋白质印迹分析鉴定其表达,并以非那西丁为底物,利用HPLC对其进行代谢活性测定。结果蛋白质印迹分析表明人CYP1A2蛋白在Sf9细胞中成功表达,且该重组酶对非那西丁的Km值为（82.04±11.39）μmol·L^-1（n=3）,Vmax值为（1.78±0.26）nmol·min^-1·mg^-1蛋白（n=3）,表观清除率Clint值为0.02mL·min^-1·mg^-1蛋白。结论利用杆状病毒/昆虫细胞系统,可获得具代谢活性的人CYP1A2重组酶,该酶可进一步用于其他底物的I相代谢研究。
|
| 关 键 词： | 细胞色素P450 1A2 杆状病毒 草地夜蛾细胞 非那西丁 活性测定 |
| 收稿时间： | 1900-01-01 |
Expression and Characterization of Human Cytochrome P450 1A2 |
| |
| RUAN Hao,CHEN Shuqing,YAO Tongwei. Expression and Characterization of Human Cytochrome P450 1A2[J]. The Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2009, 26(9): 697-702 |
| |
| Authors: | RUAN Hao CHEN Shuqing YAO Tongwei |
| |
| Affiliation: | College of Pharmaceutical Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China |
| |
| Abstract: | OBJECTIVE To study the intestinal absorption of low molecular weight heparin (LMWH) in rats using cell-permeable peptides R6 as absorption enhancer. METHODS The intestine absorption enhancing effect of R6 on LMWH was determined by the changes of blood coa |
| |
| Keywords: | low molecular weight heparin cell-penetrating peptide R6 |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国现代应用药学》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国现代应用药学》下载全文 |
|
