| RNA干扰抑制胆囊癌血管内皮细胞生长因子的实验研究 |
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| 引用本文： | 张阳德,曲华伟,何剪太,陈玉祥.RNA干扰抑制胆囊癌血管内皮细胞生长因子的实验研究[J].航空航天医药,2010,21(2):165-166,207. |
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| 作者姓名： | 张阳德 曲华伟 何剪太 陈玉祥 |
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| 作者单位： | 中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南,长沙,410008 |
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| 基金项目： | 中南大学博士研究生学位论文创新项目资助 |
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| 摘 要： | 目的：构建编码胆囊癌VEGF基因的短发夹状RNA（shRNA）,观察shRNA干扰对胆囊癌血管内皮细胞表达的影响。方法：根据人VEGF基因的序列选择了4个位点设计shRNA,制备VEGF-shRNA质粒表达载体,并进行测序分析。将重组质粒转染到胆囊癌细胞GBC-SD中,采用荧光PCR检测VEGF-mRNA表达情况,ELISA法及Western-blot法检测VEGF蛋白含量。结果：成功构建了靶向VEGF基因的shRNA质粒表达载体,并经测序验证。实时荧光PC分析shRNA2抑制VEGF基因的mRNA表达,抑制率可达86%.由ELISA法及Western-blot法看出ShVEGF-1、ShVEGF-2、ShVEGF-3、ShVEGF-4中VEGF的表达得到明显的抑制,且Sh-VEGF-4效果最显著（P〈0.05）,而NC细胞（阴性对照）则基本没有抑制VEGF的表达（P〉0.05）。结论：成功构建靶向VEGF的shRNA表达质粒,其对胆囊癌血管内皮细胞表达具有明显抑制作用。
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| 关 键 词： | RNA干扰 血管内皮生长因子 质粒表达载体 |
Short Hairpin RNA Targeting Vascular Endothelial Growth Factor Inhibits Expression of Vascular Endothelial Cell in Human GBC- SD Cells |
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| Institution: | ZHANG Yang-de,QU Hua-wei,HE Jian-tai,et al.(National Hepatobiliary ＆ Enteric Surgery Research Center of South University,Changsha 410008,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNAi Vascular endothelial growth factor Plasmid expression vector |
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