改良R18S3冷冻液对cre转基因小鼠精子冷冻效果探讨

目的 比较改良精子冷冻液与传统冷冻液对cre转基因小鼠的精子冻存和体外受精率的影响,建立采用精子冷冻技术稳定保存两种cre转基因小鼠的方法.方法 以R18S3作为精子冷冻液和以R18S3作为基础液添加477 μmol/L的硫代甘油（MTG）配成R18S3＋MTG冷冻液,冻存Neurog3-cre和Itgax-cre雄鼠精子,采用相同方法复苏精子.同时,以两种cre小鼠的背景鼠C57BL/6J作为对照组,另选用ICR和FVB小鼠用两种冷冻液冻存并复苏精子,进行体外受精,统计受精率来评价精子冷冻效果.结果 以R18S3冷冻并复苏的两种ere小鼠及野生型C57BL/6J的精子体外受精率分别为10.5％,11.6％和12.0％,无显著差异.以R18S3＋MTG冷冻并复苏的精子体外受精率分别为66.4％,62.5％和67.6％,相对传统冷冻液有显著提高.ICR和FVB小鼠用改良精子冷冻液前后的体外受精率分别是34.1％,46.7％和65.7％和70.2％,后者都有所提高.结论 改良后的R18S3＋MTG冷冻液能明显提高以C57BL/6J为背景的cre转基因小鼠冷冻后精子的体外受精率,对ICR和FVB品系的小鼠的体外受精率也有提高.