免疫凋亡素e23sFv-Fdt-RC6对HER2阳性胶质瘤细胞U251的杀伤作用 |
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引用本文: | 张雷鸣,任君琳,孟艳玲,杨双武,许彦鸣,杨安钢,张剑宁.免疫凋亡素e23sFv-Fdt-RC6对HER2阳性胶质瘤细胞U251的杀伤作用[J].细胞与分子免疫学杂志,2011,27(1). |
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作者姓名: | 张雷鸣 任君琳 孟艳玲 杨双武 许彦鸣 杨安钢 张剑宁 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学,西京脑科医院神经外科,陕西,西安,710032 2. 第四军医大学,基础部免疫学教研室,陕西,西安,710032 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的:探讨靶向活性caspase-6融合蛋白对HER2阳性胶质瘤细胞系U251的促凋亡作用.方法:利用白喉毒素furin酶识别序列(Fdt)连接抗HER2单链抗体基因e23sFv和重构型caspase-6(RC6)基因,连接入pCMV载体,构建重组基因的真核表达载体pCMV-e23sFv-Fdt-RC6.脂质体转染HER2阳性胶质瘤U251细胞系,Western blot检测目的蛋白的表达.流式细胞术(FCM)检测转染后U251细胞的凋亡率,MTT法检测目的基因转染后对U251细胞增殖的影响.结果:双酶切及基因测序证实,pCMV-e23sFv-Fdt-RC6载体被成功构建.Western blot检测到转染表达载体48 h后的U251细胞中有活性caspase-6的表达.FCM检测到实验组细胞凋亡率比对照组显著增高.MTT实验观察到转染载体pCMV-e23sFv-Fdt-Rc6的U251细胞的增殖被明显抑制.结论:e23sFv-Fdt-RC6融合蛋白对HER2阳性胶质瘤细胞系U251有明显的促凋亡作用.
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关 键 词: | 胶质瘤 细胞凋亡 |
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