带有GFP标签的汉滩病毒糖蛋白表达载体的构建 |
| |
作者姓名: | 张宇丝 马樱 易静 刘蓓 徐竹蔚 张春梅 庄然 金伯泉 |
| |
作者单位: | 第四军医大学免疫学教研室,陕西,西安,710032 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金重点项目 |
| |
摘 要: | 目的:构建带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白(GP)真核表达载体,并进行初步表达鉴定.方法:以peGFP-C1质粒为模板扩增GFP片段,将其插人真核表达载体pFLAG-CMV3中,构建成可表达带有GFP标签分泌型蛋白的载体pFLAG-CMV3-GFP.扩增HTNV-G1、HTNV-G2,分别插入上述载体,转染293T细胞,采用检测GFP标签蛋白的夹心ELISA法检测转染细胞培养上清中分泌型重组蛋白的含量.结果:酶切及测序证实带有GFP标签的HTNV-G1、HTNV-G2表达载体构建成功,分别命名为pFLAG-G1-GFP/pFLAG-G2-GFP,转染细胞的培养上清中可以检测出带有GFP标签的融合蛋白.结论:成功构建了带有GFP标签HTNV-GP的重组质粒并成功表达,为深入研究HTNV感染后机体针对HTNV-GP的特异性免疫应答规律奠定了实验基础.
|
关 键 词: | 汉滩病毒 糖蛋白 |
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录! |
|