|
|||||
|
|
| 慢病毒载体介导IL-24基因转导人骨髓间充质干细胞的实验研究 | |
| 引用本文： | 祁秋干,周清华,李印,李伟强,陈霏,秦建军. 慢病毒载体介导IL-24基因转导人骨髓间充质干细胞的实验研究[J]. 中国肺癌杂志, 2013, 16(1): 7-11 |
| 作者姓名： | 祁秋干 周清华 李印 李伟强 陈霏 秦建军 |
| 作者单位： | 1. 300052天津,天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室,天津市肺癌研究所,天津医科大学总医院;450005郑州,郑州大学附属肿瘤医院胸外科 2. 300052天津,天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室,天津市肺癌研究所,天津医科大学总医院 3. 郑州大学附属肿瘤医院胸外科,郑州,450005 4. 中山大学干细胞与组织工程中心,广州,510080 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.81071909)资助~~ |
| 摘 要： | 背景与目的 以人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)作为抑癌基因IL-24的细胞载体的研究目前未见报道.应用Gateway法构建共表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因和IL-24基因的慢病毒载体,探讨其对hBMSCs的转导情况,为今后肿瘤的基因治疗奠定基础.方法 应用DNA重组技术构建含有IL-24和EGFP基因的慢病毒表达载体,并与慢病毒包装系统(ViraPowerTM Lentiviral Packaging Mix)共转染293FT细胞,收集上清,纯化浓缩,测定重组病毒的滴度.取重组慢病毒感染hBMSCs,通过嘌呤霉素筛选并纯化hBMSCs,应用实时荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)及ELISA法分别检测hBMSCs中IL-24mRNA及IL-24蛋白水平的表达情况.结果 成功构建了共表达IL-24和EGFP基因的重组慢病毒载体,经包装、纯化及浓缩,病毒滴度为7.25× 107 PFU/mL.重组慢病毒转导hBMSCs后,通过筛选获得纯化,转导效率可达到100％.qPCR检测示:转导组IL-24 mRNA表达明显高于未转导组(P＜0.05)；ELISA法检测显示转导组hBMSCs上清液IL-24蛋白表达40 μg/L,未转导组为阴性.结论 构建的携带IL-24基因的重组慢病毒载体可有效转导hBMSCs,表达IL-24蛋白. |
| 关 键 词： | 人骨髓间充质干细胞 IL-24 EGFP 基因转导 慢病毒载体 |
Study on Transduction of IL-24 Gene in Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells by Lentiviral Vector |
|
| Qiugan QI , Qinghua ZHOU , Yin LI , Weiqiang LI , Fei CHEN , Jianjun QIN. Study on Transduction of IL-24 Gene in Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells by Lentiviral Vector[J]. Chinese journal of lung cancer, 2013, 16(1): 7-11 | |
| Authors: | Qiugan QI Qinghua ZHOU Yin LI Weiqiang LI Fei CHEN Jianjun QIN |
| Affiliation: | 1Tianjin Key Laboratory of Lung Cancer Metastasis and Tumor Microenvironment, Tianjin Lung Cancer Institute, Tianjin Medical University General Hospital, Tianjin 300052, China; 2Department of Thoracic Surgery, Tumor Hospital of He’nan, Zhengzhou 450005, China; 3Center for Stem Cell Biology and Tissue Engineering, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |