以部分脱钙冻干骨材料为支架组织工程骨移植早期免外周血T淋巴细胞亚群的变化

背景：骨衍生材料中冻干骨异抗原去除不充分，免疫原性强烈：脱蛋白骨和完全脱钙骨基质抗原性较弱，但前者无成骨诱导能力，后者生物力学性能很差，临床应用受到限制。目的：观察以部分脱钙冻干骨材料为支架的组织工程骨移植后兔外周血T细胞亚群的变化及移植组织的组织学变化。设计、时间及地点：随机分组设计、动物对照观察，于2006—06／2007—06在四川大学华西医院，生物治疗国家重点实验室与干细胞与组织工程研究室完成。材料：组织工程骨以兔骨膜来源的成骨细胞为种子细胞，经抗原自消化、部分脱钙、冻干后的异体骨为支架材料于体外构建。方法：将48只兔按随机数字表法分为4组，每组12只。分别用部分脱钙冻干骨、组织工程骨、自体骨、同种异体骨植入兔桡骨1cm节段性缺损处。主要观察指标：流式细胞仪检测4组植入前及植入后1，2，4周移植早期外周血T淋巴细胞亚群变化，并通过组织学检测观察植入后2，4，8，12周时4种材料的成骨作用。结果：①部分脱钙冻干骨组、组织工程骨组植入后1，2周外周血CD4^＋和CD8^＋T细胞较植入前明显升高（P〈0．05）。植入后4周CD4^＋T细胞较植入前偏高不显著（P〉0．05）。自体骨组植入后CD4^＋和CD8^＋T细胞升高不明显（P〉0．05）。同种异体骨组植入后1，2，4周外周血CD4^＋和CD8^＋T细胞较植入前及其他各组同期均明显增高（P〈0．05）。②组织工程骨组植入后2周与材料孔隙内有成骨细胞和成软骨细胞，可见骨及软骨混合性新生物形成，周边分布有破骨细胞，部分网架呈蚕食状被破坏吸收。植入后4周，形成的新生骨过渡为编织骨。植入后8周，形成板层骨，部分脱钙冻干骨支架材料已被完全降解、吸收。植入后12周，植入物均已完全被板层样骨所替代，髓腔再通。结论：部分脱钙冻干骨为支架材料构建的细胞-材料复合体移植后外周血T淋巴细胞增高，但不影响其良好的修复骨缺损能力。