| 靶向Skp2基因siRNA对大肠癌细胞生物学特性的影响 |
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| 引用本文： | 解方为,彭永海,张霞,欧阳学农.靶向Skp2基因siRNA对大肠癌细胞生物学特性的影响[J].世界华人消化杂志,2009,17(8). |
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| 作者姓名： | 解方为 彭永海 张霞 欧阳学农 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军南京军区,福州总医院肿瘤科,福建省福州市,350025 |
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| 摘 要： | 目的:设计和构建Skp2特异性的siRNA真核表达载体,观察Skp2siRNA重组体对人大肠癌HCT116细胞株生物学特性的影响.方法:人工合成Skp2基因干扰序列并定向插入到RNAi真核表达载体pRNAT-U6.1/Neo,通过测序鉴定.用脂质体介导的基因转染方法转入HCT116细胞,经G418筛选出稳定转染的细胞系,半定量RT-PCR方法检测靶基因的表达.流式细胞技术分析细胞周期分布,MTT比色法检测细胞的生长抑制率.结果:测序表明Skp2干扰序列完全正确.RTPCR结果显示2条Skp2siRNA真核表达质粒均能有效抑制核干细胞因子mRNA的转录表达( P<0.05).MTT比色法检测显示,与阴性对照组及未转染组细胞比较,干扰组细胞增殖率明显下降(29.21%±1.40%,30.10%±1.50% vs49.05%±4.50%,53.03%±4.92%,均P<0.05).流式细胞术检测结果显示转染后G0/G1期细胞数占生长周期细胞数的比例增多,即表现为G1期阻滞,S期细胞的比例降低.结论:成功构建了S k p 2 干扰真核表达载体,siRNA重组体能有效抑制人大肠癌细胞Skp2mRNA表达,细胞增殖能力减弱,为大肠癌基因治疗的可行性提供了有力的证据.
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| 关 键 词： | Skp2基因 肠肿瘤 RNA干扰 基因表达 |
Influence of Skp2-targeted siRNA on characteristics of human colorectal cancer cell line |
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| Fang-Wei Xie,Yong-Hai Peng,Xia Zhang,Xue-Nong Ouyang.Influence of Skp2-targeted siRNA on characteristics of human colorectal cancer cell line[J].World Chinese Journal of Digestology,2009,17(8). |
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| Authors: | Fang-Wei Xie Yong-Hai Peng Xia Zhang Xue-Nong Ouyang |
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